薄層掃描儀是一種基于薄層色譜(TLC)技術(shù)的高精度分析儀器,廣泛應(yīng)用于核醫(yī)學(xué)、藥物質(zhì)量控制、環(huán)境監(jiān)測(cè)及科研領(lǐng)域。其核心功能是通過分離與檢測(cè)樣品中的不同成分,實(shí)現(xiàn)定性和定量分析,并生成二維或三維圖像以評(píng)估物質(zhì)分布。
薄層掃描儀由光學(xué)系統(tǒng)、掃描臺(tái)、探測(cè)器及數(shù)據(jù)處理模塊組成。工作時(shí),樣品點(diǎn)涂于薄層板(如硅膠板)后,經(jīng)流動(dòng)相展開形成分離斑紋。儀器通過長(zhǎng)波長(zhǎng)光束(如254nm、365nm)或熒光激發(fā)檢測(cè)斑點(diǎn)光強(qiáng)變化,結(jié)合CCD傳感器或閃爍體探測(cè)器采集信號(hào),轉(zhuǎn)化為數(shù)字圖像。部分型號(hào)采用雙波長(zhǎng)鋸齒掃描技術(shù),通過交替使用最大吸收波長(zhǎng)與極小吸收波長(zhǎng),消除薄層板不均勻?qū)е碌恼`差,分析誤差可控制在3%以內(nèi)。
1、正確放置TLC板
將TLC板水平、穩(wěn)固放入樣品臺(tái),確保不傾斜或翹曲;
板面朝向掃描頭(通常有標(biāo)記指示方向);
部分儀器支持自動(dòng)進(jìn)樣器,需按規(guī)格對(duì)齊卡槽。
2、選擇合適的檢測(cè)模式
反射法(Reflectance):適用于不透明板(如鋁箔背襯);
透射法(Transmittance):適用于玻璃板(較少用);
檢測(cè)波長(zhǎng):
紫外吸收:常用254 nm(硅膠GF254板)或280 nm、365 nm;
可見光/熒光:根據(jù)顯色劑或化合物自身熒光選擇(如366 nm激發(fā));
若使用顯色劑(如硫酸乙醇、碘蒸氣),需確保顯色均勻且穩(wěn)定后再掃描。
3、設(shè)置掃描參數(shù)
掃描速度:慢速(如20 mm/min)提高分辨率,快速用于篩查;
狹縫寬度:窄狹縫(如0.1×4 mm)提高靈敏度,寬狹縫用于強(qiáng)信號(hào);
Y軸范圍(Rf值范圍):設(shè)定合理掃描區(qū)間,避免無效區(qū)域干擾。
4、避免人為干擾
掃描過程中禁止移動(dòng)或觸碰儀器及TLC板;
關(guān)閉儀器防護(hù)蓋(如有),防止環(huán)境光干擾。
